Empleo de oligonucleóticos y DNAzimas peroxidasas para biosensado y detección de biomarcadores

Abstract

El objetivo central de esta tesis es la utilización de ácidos nucleicos como elementos de reconocimiento biológico y amplificación de la señal para su empleo en biosensores y en la detección de biomarcadores. Los lineamientos generales del trabajo se basan en el uso de una secuencia de reconocimiento específico contra una molécula blanco, unida a una DNAzima peroxidasa, la cual actúa como generador de una señal óptica o electroquímica. En primer lugar, se estudió la actividad catalítica de la DNAzima peroxidasa y se pusieron a punto las condiciones óptimas para ser usada como elemento amplificador de la señal. En una segunda etapa, se acopló la DNAzima peroxidasa a oligonucleótidos para la detección electroquímica de una secuencia genómica complementaria a un gen de la toxina Shiga 1 de E. coli verotoxigénica. Finalmente se presentan los resultados del empleo de conjugados de DNAzimas y aptámeros contra el biomarcador tumoral PTEN en secciones histológicas.